“2012LSAC生命科技論壇：干細(xì)胞技術(shù)與應(yīng)用”將于2012年10月17日~18日在上海新國(guó)際博覽中心與“慕尼黑上海生化分析展”同期召開(kāi)。
干細(xì)胞經(jīng)歷最近十年的飛速發(fā)展，從胚胎干細(xì)胞，到成體干細(xì)胞，進(jìn)一步到iPS，以及這些細(xì)胞在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床中應(yīng)用，從小規(guī)模的臨床研究到部分干細(xì)胞產(chǎn)品的上市，無(wú)疑給未來(lái)的臨床應(yīng)用領(lǐng)域提供巨大想象空間。
本次主題論壇旨在傳遞干細(xì)胞領(lǐng)域最新前沿進(jìn)展，介紹干細(xì)胞基本研究最新技術(shù)與臨床應(yīng)用。論壇將邀請(qǐng)國(guó)內(nèi)外著名的干細(xì)胞領(lǐng)域?qū)＜?、學(xué)者，在介紹干細(xì)胞研究領(lǐng)域的最新進(jìn)展同時(shí)，還邀請(qǐng)?jiān)诟杉?xì)胞領(lǐng)域技術(shù)方面具有突破性進(jìn)展的企業(yè)科學(xué)家參與演講，全面介紹干細(xì)胞領(lǐng)域領(lǐng)先的、實(shí)用新技術(shù)，促進(jìn)基礎(chǔ)研究與臨床應(yīng)用的融合。
以下是本次論壇的部分嘉賓的演講摘要，更多相關(guān)資訊可關(guān)注生物谷會(huì)議官方微博（@生物谷會(huì)議），或登錄會(huì)議官網(wǎng)：2012LSAC生命科技論壇：干細(xì)胞技術(shù)與應(yīng)用
Modeling Rett Syndrome using human ES cell-derived neurons
Human pluripotent stem cells, including embryonic stem cells (hESCs) and induced pluripotent stem cells (iPSCs), and their differentiated progeny offer extraordinary potential for medical research as cell therapy agents and disease models. It remains, however, a challenge to reveal physiologically-relevantphenotypes and underlying molecular and cellular mechanisms of complex human disorders using hESC/iPSC-derived systems{Marchetto, #136; Saha, 2009 #137}. Neuropsychiatric disorders often involve altered neuronal network activities {Ramocki, 2008 #116; Sudhof, 2008 #123}, providing a fundamental rationale for the examination of synaptic transmission in combination with mechanistic studies in hESC/iPSC-based disease models. As a proof-of-principle study, we report here the establishment of a hESC-based model for Rett Syndrome (RTT), an autism spectrum disorder (ASD) caused by mutations of the Methyl-CpG binding Protein 2 (MeCP2) gene{Amir, 1999 #16}. We demonstrate that MeCP2-deficiency in human neurons induces a shift of spontaneous synaptic activity from primarily glutamatergic excitatory (E) to predominantly GABAergic inhibitory (I) transmission. This increased inhibitory activity is associated with an increased density of GABAergic synapses, and with abnormal expression of several genes involved in synaptic transmission and autism. Using a genetic rescue approach we confirmed the causality between MeCP2 deficiency and the neurotransmission phenotype. Such genetic rescue paradigms could serve as essential controls in other human stem cell including iPSC-based disease models. In summary, we have established a novel hESC-based model for RTT and revealed robust and measurable disease-related phenotypes. The E/I neurotransmission imbalance and shared defects in gene expression suggest that RTT and autism might have common molecular mechanisms. Moreover, we demonstrated that the overall strategy of coupling synaptic transmission and gene expression analyses to phenotype hESC/iPSC-derived diseased neurons could become a general approach to tackle other neuropsychiatric or neurodevelopmental diseases, paving the way to novel therapeutic interventions.
組蛋白修飾在誘導(dǎo)多能干細(xì)胞形成中的作用與機(jī)制
誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS）的誕生為病人的個(gè)性化治療提供了新思路，但是在iPS細(xì)胞的形成機(jī)制依然需要進(jìn)一步的探究。目前認(rèn)為，組蛋白修飾（酶）等表觀遺傳修飾特異性的改變尤其是組蛋白乙酰化在iPS形成中具有極其重要的作用。我們的最新研究發(fā)現(xiàn)特定HDAC蛋白的干擾病毒可以有效促進(jìn)iPS細(xì)胞進(jìn)入成熟期進(jìn)而提高誘導(dǎo)效率和質(zhì)量，這些HDAC蛋白極有可能是通過(guò)多能性標(biāo)志基因Nanog及其組成的正反饋環(huán)路進(jìn)而在iPS細(xì)胞形成過(guò)程中發(fā)揮重要作用，這為組蛋白修飾在iPS細(xì)胞形成中的功能和機(jī)制提供了新的理論基礎(chǔ)。
化學(xué)小分子增強(qiáng)多能干細(xì)胞的誘導(dǎo)
哺乳動(dòng)物從受精卵發(fā)育成個(gè)體的過(guò)程一直被認(rèn)為是不可逆的。而近期研究展示了已經(jīng)分化的體細(xì)胞可以通過(guò)外源表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子（包括Oct4, Sox2, Klf2, cMyc等）而被重編程回到類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的多能狀態(tài)，而這類(lèi)細(xì)胞被稱(chēng)為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS）。iPS與胚胎干細(xì)胞非常相似，可分化為各種體細(xì)胞。四倍體互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)也證實(shí)iPS可以獨(dú)立發(fā)育成個(gè)體。由于不存在倫理問(wèn)題及免疫排斥問(wèn)題，iPS技術(shù)為干細(xì)胞的研究和臨床應(yīng)用提供了有利條件。然而，外源轉(zhuǎn)錄因子及病毒載體的使用使其安全性受到質(zhì)疑；而且iPS的誘導(dǎo)效率尚底，誘導(dǎo)機(jī)制也不十分明了。這一切都阻礙了iPS的應(yīng)用。
利用小分子化合物來(lái)增加iPS誘導(dǎo)效率，并輔助解析iPS誘導(dǎo)機(jī)制是一條可行之路。我們建立了基于96－孔板體系的篩選體系，尋找能夠增加iPS效率并替代轉(zhuǎn)錄因子的小分子化合物，發(fā)現(xiàn)了一批能夠有效促進(jìn)重編程的化合物，包括老藥LiCl等。
宮內(nèi)膜干細(xì)胞誘導(dǎo)分化及其應(yīng)用潛能
干細(xì)胞在特定的體內(nèi)外微環(huán)境下，能夠誘導(dǎo)分化成為多種組織細(xì)胞，甚至是一些曾經(jīng)被人們認(rèn)為不可再生的組織器官，通過(guò)移植參與受者組織的再生與修復(fù)，為臨床醫(yī)學(xué)提供了一個(gè)新的充滿(mǎn)希望的治療手段，使得一直困擾人類(lèi)的醫(yī)學(xué)難題有了新的希望，如肝病、糖尿病、癌癥、帕金森病等。我國(guó)肝病大國(guó)，肝硬化是臨床常見(jiàn)的危重癥，且目前缺乏有效的治療手段，病死率高。干細(xì)胞移植與傳統(tǒng)肝移植治療方法相比，不存在免疫排斥及倫理問(wèn)題。這項(xiàng)技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)小、痛苦少，利用其組織再生和損傷修復(fù)的功能，可在一定程度上改善終末期肝病患者的肝功能。
宮內(nèi)膜干細(xì)胞是新近發(fā)現(xiàn)的間充質(zhì)干細(xì)胞，符合間充質(zhì)干細(xì)胞的一般標(biāo)準(zhǔn)，在體外可以穩(wěn)定增殖而不發(fā)生核型的改變，具有免疫原性低，無(wú)致瘤性的特點(diǎn)，在體外可以誘導(dǎo)分化為多系細(xì)胞。該報(bào)告將從宮內(nèi)膜干細(xì)胞體外誘導(dǎo)為肝樣細(xì)胞、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究等領(lǐng)域，揭示宮內(nèi)膜干細(xì)胞在肝病損傷治療中的應(yīng)用潛能。
反因子核酸酶及其在干細(xì)胞基因工程與基因治療中的應(yīng)用
轉(zhuǎn)錄激活樣因子（TALE）為近年發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)可識(shí)別堿基的氨基酸序列高度重復(fù)蛋白質(zhì)，來(lái)源于一種革蘭氏陰性細(xì)菌，每一重復(fù)單元大多由33-35 個(gè)氨基酸組成，其中第12 和13 位氨基酸共同負(fù)責(zé)識(shí)別1 個(gè)堿基，目前廣泛使用的識(shí)別單元為四種，即NI 識(shí)別A, HD 識(shí)別C, NG 識(shí)別T, NN 識(shí)別G 或 A。這種與核酸堿基具有確切互補(bǔ)識(shí)別關(guān)系的生物模塊，可用于構(gòu)建人工轉(zhuǎn)錄因子或基因工程酶，在工農(nóng)業(yè)和生物醫(yī)學(xué)中具有十分重大的理論和應(yīng)用價(jià)值。其中由轉(zhuǎn)錄激活樣因子與FokI 酶的核酸酶裂解中心所形成的反因子核酸酶（TAL effector nucleases,TALENs），在物種基因改造，基因治療等多方面已顯示出其他工程酶如鋅指蛋白酶與歸巢核酸酶或巨核酸酶所無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)。近兩年來(lái)，我們?cè)赥ALE 這一具有巨大應(yīng)用價(jià)值的生物元件的適配性與模塊庫(kù)的構(gòu)建上，研發(fā)了高效的克隆技術(shù)，完成了包含256 個(gè)可識(shí)別任意4個(gè)堿基序列的TAL 模塊文庫(kù)，目前正在克隆一系列針對(duì)重要基因靶的TALENs。就我國(guó)科技發(fā)展而言，下列幾個(gè)方向?qū)⑹刮磥?lái)反因子核酸酶研究的重點(diǎn)：(1)識(shí)別八堿基TALE 文庫(kù)的構(gòu)建；(2)針對(duì)多個(gè)重要靶基因的TALENs的裝配以及剪切譜與脫靶效應(yīng)測(cè)評(píng)； (3) TALENs 用于遺傳病的基因治療可行性研究; (4) TALENs 用于腫瘤的基因治療可行性研究; (5) TALENs 用于疾病動(dòng)物模型構(gòu)建的應(yīng)用性研究; (6) TALENs 用于農(nóng)作物物種改良的可行性研究。本報(bào)告將就TALENs的克隆，組裝，作用于副作用評(píng)價(jià)，在干細(xì)胞基因工程中的應(yīng)用，在正向基因治療和反向基因治療中的應(yīng)用等，予以較詳細(xì)介紹。
間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用
間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）也被稱(chēng)為多能間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞，已被證實(shí)在體內(nèi)多種組織中存在，并且在組織修復(fù)與再生過(guò)程中是一種十分重要的細(xì)胞來(lái)源。在組織損傷等病理?xiàng)l件下，這些細(xì)胞會(huì)遷移到損傷部位。在損傷部位，通常會(huì)伴隨由先天免疫和獲得性免疫細(xì)胞產(chǎn)生的促炎癥細(xì)胞因子。間充質(zhì)干細(xì)胞會(huì)在這些炎癥因子刺激下被激活。事實(shí)上最近已有文章報(bào)道間充質(zhì)干細(xì)胞與炎癥細(xì)胞會(huì)相互作用，并且這種作用在決定炎癥反應(yīng)結(jié)果的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
我們發(fā)現(xiàn)了間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)于免疫反應(yīng)有直接的影響，即在動(dòng)物和人中，無(wú)論是在體內(nèi)還是體外都有很強(qiáng)的免疫抑制作用。我們利用小鼠骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞克隆與新分離的T細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞能夠抑制T細(xì)胞增殖以及其分泌的細(xì)胞因子。我們進(jìn)一步證實(shí)了這種免疫抑制作用是IFN?與TNF?、IL-1? 或者 IL-1?三個(gè)細(xì)胞因子中的任何一種協(xié)同作用的結(jié)果。這些細(xì)胞因子的組合能夠刺激間充質(zhì)干細(xì)胞分泌大量的趨化因子以及一氧化氮合成酶（iNOS）。趨化因子能夠把T細(xì)胞趨化到間充質(zhì)干細(xì)胞周?chē)?，而周?chē)邼舛鹊囊谎趸湍軌蛞种芓細(xì)胞反應(yīng)。這種由細(xì)胞因子刺激引起的免疫抑制現(xiàn)象在iNOS或者IFN?受體缺失小鼠的間充質(zhì)干細(xì)胞中是不存在的。而且對(duì)趨化因子受體進(jìn)行阻斷也能去除野生型間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫抑制作用。在體內(nèi)，野生型間充質(zhì)干細(xì)胞能夠治療小鼠的GVHD，如果同時(shí)使用IFN?的抗體或者iNOS的抑制劑，這種治療作用就會(huì)消失，同樣的，iNOS或者IFN?受體缺失的間充質(zhì)干細(xì)胞也沒(méi)有治療效果。野生型間充質(zhì)干細(xì)胞也能夠抑制遲發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)，而iNOS缺失的間充質(zhì)干細(xì)胞卻相反的有加重效果。有趣的是，我們最近研究表明人來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞也同樣在受到類(lèi)似的細(xì)胞因子刺激時(shí)有免疫抑制作用，與小鼠不同的是，起到免疫抑制作用的因子不是一氧化氮，而是IDO。因此，促炎癥因子能夠誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞產(chǎn)生趨化因子和一氧化氮（小鼠）或者IDO（人），它們能夠協(xié)同作用行使免疫抑制作用。在臨床上，人類(lèi)來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞已經(jīng)在晚期肝病病人中展示了驚人的治療效果。
同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞在某些情況下也能促進(jìn)免疫反應(yīng)。這種免疫促進(jìn)作用發(fā)生在微環(huán)境中炎癥因子的量不足以刺激間充質(zhì)干細(xì)胞產(chǎn)生足夠大量的NO時(shí)。當(dāng)iNOS的活性被抑制或使用iNOS缺失的MSCs時(shí)，MSCs會(huì)在體外T細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中強(qiáng)烈地促進(jìn)T細(xì)胞的擴(kuò)增。我們也在小鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)（DTH）這一體內(nèi)模型中得到了類(lèi)似的結(jié)果。此外，iNOS缺失的MSCs能顯著地抑制黑色素瘤的生長(zhǎng)。這可能是在缺乏NO的情況下，MSCs產(chǎn)生的趨化因子能促進(jìn)免疫反應(yīng)。事實(shí)上，在趨化因子CCR5和CXCR3雙敲除小鼠體內(nèi)，iNOS缺失的MSCs抑制黑色素瘤生長(zhǎng)的能力被大大削弱了。因此，NO在MSC介導(dǎo)的免疫調(diào)節(jié)作用中發(fā)揮了類(lèi)似調(diào)節(jié)開(kāi)關(guān)的作用。更重要的是，我們?cè)谌梭w來(lái)源的MSCs中發(fā)現(xiàn)了其對(duì)免疫系統(tǒng)有類(lèi)似的雙效免疫調(diào)節(jié)作用。在這一調(diào)節(jié)過(guò)程中，吲哚胺雙加氧酶（IDO）發(fā)揮了調(diào)節(jié)開(kāi)關(guān)的作用。這一研究為我們理解MSCs在病理及生理過(guò)程中的作用提供了新的信息。
間充質(zhì)干細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)具有強(qiáng)大的增殖能力，足夠?yàn)轶w外和體內(nèi)研究使用。對(duì)于其免疫調(diào)節(jié)的性質(zhì)的進(jìn)一步研究會(huì)為其臨床應(yīng)用提供至關(guān)重要的信息。
人骨髓基質(zhì)干細(xì)胞源性神經(jīng)元的形成及對(duì)損傷脊髓的保護(hù)作用
腦或脊髓的創(chuàng)傷或退行性疾患如脊髓損傷（spinal cord injury）、ELISA等多種方法證實(shí)了這一結(jié)果。細(xì)胞移植入大鼠損傷脊髓后，大鼠的運(yùn)動(dòng)及感覺(jué)功能均有不同程度的改善，細(xì)胞能夠存活、但存活率還有待改善，如何能夠增加植入體內(nèi)細(xì)胞的存活率，是我們今后進(jìn)一步關(guān)注的重點(diǎn)。
干細(xì)胞在炎癥相關(guān)的肝病中作用及應(yīng)用前景
干細(xì)胞是一類(lèi)具有自我更新能力的多潛能細(xì)胞，在一定條件下可分化為多種功能的細(xì)胞。不但在疾病治療和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域顯示了廣闊的應(yīng)用前景，同時(shí)干細(xì)胞及其微環(huán)境異常也與許多疾病的發(fā)生密切相關(guān)。相關(guān)研究不但有助于干細(xì)胞應(yīng)用，同時(shí)有助于相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)制認(rèn)識(shí)。炎癥相關(guān)肝病是影響國(guó)人健康的一類(lèi)主要疾病，包括肝炎、肝硬化及肝癌。這類(lèi)疾病均伴有炎癥損傷和修復(fù)，干細(xì)胞與這類(lèi)疾病發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，但其確切作用及機(jī)制不清。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）具有向組織損傷部位特異性趨化的特性，因此MSCs可特異性趨化至肝臟損傷部位參與修復(fù)。一方面MSCs具有多向分化潛能，可通過(guò)直接分化為成體細(xì)胞達(dá)到修復(fù)損傷的作用；另一方面，MSCs的免疫抑制功能在減輕肝臟炎癥相關(guān)的肝損傷方面起到重要作用。MSCs表達(dá)I類(lèi)主要組織相容性復(fù)合體而不表達(dá)II類(lèi)主要組織相容性復(fù)合體及B7-1, B7-2等，這使得MSCs免疫原性較弱。輸注同種異體MSCs甚至異種MSCs，一般不易引起宿主的免疫排斥反應(yīng)。在MSCs對(duì)T細(xì)胞的免疫抑制過(guò)程中，細(xì)胞間接觸及可溶性因子的作用均十分重要。目前多種免疫抑制相關(guān)因子包括TGF-β、IL-10、Prostaglandin E2(PGE2)、Hepatocyte growth factor (HGF)、Indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO)及 Inducible nitric oxide synthase (iNOS）均與MSCs的免疫抑制功能有關(guān)。趨化至肝損傷部位的MSCs可通過(guò)其免疫抑制功能有效降低肝臟炎癥相關(guān)的損傷，保護(hù)肝功能。因此，MSCs在炎癥相關(guān)的肝病治療中對(duì)于肝功能的保護(hù)和恢復(fù)可能起到重要作用，具有非常廣闊的臨床應(yīng)用前景。
靶向腫瘤干細(xì)胞治療癌癥的新策略
腫瘤干細(xì)胞是一群具有自我更新、多向分化潛能、具有啟動(dòng)和重建腫瘤組織表型能力的腫瘤細(xì)胞。前期研究均表明，腫瘤干細(xì)胞形成于腫瘤早期甚至癌前病變，始動(dòng)腫瘤發(fā)生和演進(jìn)；腫瘤干細(xì)胞具有多向分化潛能，是腫瘤成分多樣性和分化異質(zhì)性的原因；腫瘤干細(xì)胞具有高侵襲性，是轉(zhuǎn)移的源泉；腫瘤干細(xì)胞抵抗化療和放療，是腫瘤復(fù)發(fā)的根源；腫瘤干細(xì)胞始動(dòng)和促進(jìn)血管生成，為腫瘤提供營(yíng)養(yǎng)；腫瘤干細(xì)胞具有抑制免疫細(xì)胞活性并參與腫瘤免疫逃逸機(jī)制的形成。因此，靶向腫瘤干細(xì)胞的治療策略將有望為癌癥的治療帶來(lái)希望。
我們課題組成功的從肝癌組織中，分離出多能轉(zhuǎn)錄因子Nanog高表達(dá)的新型肝癌干細(xì)胞。證實(shí)Nanog陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞具有更強(qiáng)的自我更新、克隆形成和腫瘤起始能力。他們參與腫瘤的復(fù)發(fā)和對(duì)化療藥物的耐受。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Nanog不僅可作為腫瘤干細(xì)胞的分子標(biāo)志物，同時(shí)它可通過(guò)IGF信號(hào)通路參與腫瘤干細(xì)胞的自我更新。并建立以腫瘤干細(xì)胞為平臺(tái)和Nanog為靶點(diǎn)的高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái)，已篩選出多個(gè)靶向腫瘤干細(xì)胞的小分子化合物和特異性單克隆抗體。通過(guò)該項(xiàng)研究，我們發(fā)現(xiàn)HDAC抑制劑可誘導(dǎo)腫瘤干細(xì)胞的分化，導(dǎo)致腫瘤干細(xì)胞對(duì)化療的敏感性，聯(lián)合分子靶向藥物Sorafenib成功的治療肝癌。
異基因間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療自身免疫病
間充質(zhì)干細(xì)胞( MSCs)是來(lái)源于發(fā)育早期中胚層的多能干細(xì)胞，具有高度自我更新能力和多向分化潛能，廣泛存在于全身多種組織器官，可在體外培養(yǎng)擴(kuò)增，并能分化為神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等，在細(xì)胞替代治療及組織工程方面具有極大的應(yīng)用價(jià)值。
我們用異基因正常鼠、人骨髓或臍帶來(lái)源MSCs移植狼瘡鼠（MRL/lpr），發(fā)現(xiàn)移植后尿蛋白顯著下降，疾病活動(dòng)相關(guān)指標(biāo)得到改善，且腎臟病理學(xué)變化明顯減輕, 移植過(guò)程中及移植后均無(wú)排斥反應(yīng)發(fā)生。同時(shí)發(fā)現(xiàn)經(jīng)外周靜脈輸注的異基因MSCs可遷移到病變小鼠脾臟、腎臟、肝臟、皮膚等組織，上調(diào)脾臟及淋巴結(jié)組織Foxp3+Treg比例及抑制炎癥趨化因子HMGB1、MCP-1表達(dá)。新近研究發(fā)現(xiàn)輸注體外擴(kuò)增的自體或異體骨髓來(lái)源MSCs可明顯降低膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（CIA）小鼠關(guān)節(jié)評(píng)分，抑制骨質(zhì)破壞。這種治療作用的發(fā)揮除MSCs顯著抑制Th1細(xì)胞分化外，還表現(xiàn)為MSCs可上調(diào)Treg比例、促進(jìn)Th2細(xì)胞分化；同時(shí)有研究表明MSCs的成骨、成軟骨分化功能也在其促進(jìn)骨質(zhì)修復(fù)方面發(fā)揮重要作用。MSCs可通過(guò)抑制Th1及Th17細(xì)胞分化及相關(guān)因子的表達(dá)，上調(diào)Treg及促進(jìn)Th2細(xì)胞分化，發(fā)揮抗炎及免疫調(diào)節(jié)作用，減小MS模型鼠大腦病變范圍，降低MS疾病評(píng)分，且不同種屬及組織來(lái)源MSCs均可發(fā)揮治療作用。
我們自2007年3月在世界上首次開(kāi)展異基因MSCs移植治療重癥難治性SLE患者，取得顯著臨床療效。異基因骨髓或臍帶來(lái)源MSCs移植可降低SLE患者疾病活動(dòng)性評(píng)分，改善蛋白尿、腎功能及血清學(xué)指標(biāo)，延緩系統(tǒng)受累，誘導(dǎo)疾病緩解，減少激素及免疫抑制劑用量，減輕藥物相關(guān)并發(fā)癥。對(duì)其機(jī)制方面的研究發(fā)現(xiàn)，正常MSCs可上調(diào)SLE患者外周血Treg細(xì)胞數(shù)量，抑制Th2體液免疫反應(yīng)，抑制抗體產(chǎn)生，糾正患者體內(nèi)細(xì)胞及體液免疫失衡。
此外，我們開(kāi)展了異基因MSCs移植治療其他自身免疫病的臨床研究，發(fā)現(xiàn)MSCs移植可顯著降低難治性RA患者DAS評(píng)分，改善生活質(zhì)量，上調(diào)外周血Treg水平。對(duì)于難治性多發(fā)性肌炎/皮肌炎患者，異基因MSCs移植可較好控制血清肌酸激酶水平，減少激素及免疫抑制劑用量，延緩疾病進(jìn)展。同時(shí)，MSCs對(duì)SSc、原發(fā)性干燥綜合征，炎癥性腸病 、1型糖尿病 、白塞病 、多發(fā)性硬化等自身免疫病均有較好的治療作用，可誘導(dǎo)疾病緩解，減輕影像學(xué)及病理學(xué)改變，改善患者生活質(zhì)量評(píng)分，改善免疫病相關(guān)系統(tǒng)并發(fā)癥如間質(zhì)性肺炎、難治性皮膚潰瘍、難治性血細(xì)胞減少等。部分患者移植后病情有所復(fù)發(fā)，給予多次異基因MSCs輸注仍有臨床療效,至今已完成360例患者的治療。
臨床級(jí)干細(xì)胞技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)與管理規(guī)范
當(dāng)今是一個(gè)細(xì)胞治療技術(shù)的快速發(fā)展與市場(chǎng)亂象并存的現(xiàn)狀，外媒對(duì)中國(guó)細(xì)胞治療市場(chǎng)的質(zhì)疑聲聲。其主要原因在于缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，導(dǎo)致臨床濫用，亂象叢生 ，缺乏系統(tǒng)的科學(xué)的客觀評(píng)價(jià)和專(zhuān)家認(rèn)同；其管理辦法、監(jiān)管機(jī)制、審批機(jī)構(gòu)、申報(bào)程序、審批標(biāo)準(zhǔn)等政策法規(guī)相對(duì)滯后，管理監(jiān)管缺失缺位，致使各級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)承擔(dān)著巨大的政策和管理風(fēng)險(xiǎn)，也嚴(yán)重影響了細(xì)胞治療的科學(xué)發(fā)展和可持續(xù)發(fā)展，也給患者帶來(lái)了潛在的醫(yī)療和倫理風(fēng)險(xiǎn)。因此，亟待建立創(chuàng)新性管理思路，建立標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范化的有效、安全、可控的臨床細(xì)胞治療技術(shù)平臺(tái)，配備合適的硬件設(shè)施、管理人員、管理體系和對(duì)其有效性、安全性、可控性的量化評(píng)估。確保獲取高純度、高質(zhì)量、無(wú)污染的臨床級(jí)細(xì)胞。
成體間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)決定的分子機(jī)制
目的：近來(lái)的研究表明小RNA具有調(diào)控干細(xì)胞自我更新和定向分化的功能，間充質(zhì)干細(xì)胞能分化為三胚層的一些細(xì)胞。但至今尚不清楚成體間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)決定為其他干細(xì)胞（如造血干細(xì)胞）的分子機(jī)理，不能獲得大量的轉(zhuǎn)決定后均一的干細(xì)胞群，也不清楚小RNA怎樣調(diào)控此過(guò)程的發(fā)生。由于對(duì)這些問(wèn)題的深入和全面地研究，有助于了解成體干細(xì)胞橫向分化的分子機(jī)制，有助于獲得臨床級(jí)的干細(xì)胞用于疾病的治療，也有助于解決干細(xì)胞應(yīng)用中的許多實(shí)際問(wèn)題。
方法和結(jié)果：在國(guó)家"863"專(zhuān)題的支持下，我們使用易于獲得的人體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞為研究對(duì)象（不需要配型、不需要干細(xì)胞庫(kù)，無(wú)免疫排斥，可大量擴(kuò)增），通過(guò)生物信息學(xué)和小RNA芯片篩選和鑒定一組新的人內(nèi)源性小RNA，在我們自主研制的多肽納米運(yùn)載系統(tǒng)的幫助下，高效地將它們導(dǎo)入（轉(zhuǎn)染率大于98%）間充質(zhì)干細(xì)胞，從而獲得了高轉(zhuǎn)化率（大于80%）的造血干細(xì)胞以及相應(yīng)的三系血細(xì)胞。通過(guò)體外的造血干細(xì)胞和主細(xì)胞的集落形成試驗(yàn)和體內(nèi)的造血系統(tǒng)重建試驗(yàn)驗(yàn)證了這些誘導(dǎo)的造血干細(xì)胞具有長(zhǎng)期的自我更新能力和向各種血細(xì)胞的分化能力。
結(jié)論：為解決我國(guó)的血荒問(wèn)題提供了新的技術(shù)和途徑，為人工造血提供了新的思路和方法，使血液病包括白血病的個(gè)體化治療成為可能。這一革命性醫(yī)療技術(shù)的深入和推廣，將形成巨大的社會(huì)效益和每年數(shù)億至數(shù)百億元人民幣產(chǎn)值的可觀的經(jīng)濟(jì)效益。(生物谷 Bioon.com)
