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陸道培醫(yī)院王卉主任:流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腦脊液腫瘤細(xì)胞的專家共識(shí)解讀

2021-09-16 17:49 14002

北京2021年9月16日 /美通社/ -- 2021年8月出版的《中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》上,出了中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)組織專家編寫的《流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腦脊液腫瘤細(xì)胞的專家共識(shí)》。這篇共識(shí)由河北燕達(dá)陸道培醫(yī)院王卉主任和中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院劉貴建主任執(zhí)筆并擔(dān)任通訊作者,來自全國30多家三甲醫(yī)院的40多位專家經(jīng)過研究討論共同完成。

 

為了讓大家更好了解這篇共識(shí),王卉主任做了解讀。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)是多種造血及淋巴系統(tǒng)腫瘤和非造血系統(tǒng)腫瘤容易累及的部位,急性白血病中樞累及發(fā)生率30%左右,淋巴瘤累及率5%~25%。腦脊液檢測(cè)是評(píng)價(jià)腫瘤中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累的重要依據(jù)。長(zhǎng)期以來認(rèn)為細(xì)胞學(xué)檢查是金標(biāo)準(zhǔn),然而細(xì)胞學(xué)檢查的敏感性較低,特別是在低細(xì)胞含量的樣本中敏感度更低,這些情況可能延誤患者的正確診斷和治療。

流式細(xì)胞術(shù)是上個(gè)世紀(jì)70年代問世的重要免疫學(xué)技術(shù),尤其是近30年來在血液和免疫學(xué)領(lǐng)域取得快速進(jìn)展,成為不可或缺的診斷工具。腦脊液檢測(cè)方法中,流式細(xì)胞術(shù)幾乎是目前所有技術(shù)中最快速、靈敏、實(shí)用的技術(shù),可以極大程度提高腦脊液腫瘤細(xì)胞的檢出率。

鑒于腦脊液這種微量細(xì)胞標(biāo)本的檢測(cè)不同于骨髓、外周血等常規(guī)標(biāo)本,為了規(guī)范操作,減少因技術(shù)層面導(dǎo)致的假陰性、假陽性,提高檢測(cè)靈敏度和特異性,中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)組織制定了《流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腦脊液腫瘤細(xì)胞的專家共識(shí)》(簡(jiǎn)稱《共識(shí)》)

腦脊液檢測(cè)腫瘤細(xì)胞到底有多重要呢?

王卉主任舉了一個(gè)例子,十年前一個(gè)夜晚,北京一家大三甲醫(yī)院焦急的患者父親送來一份腦脊液標(biāo)本?;純菏前l(fā)熱和頸項(xiàng)僵直的狀態(tài),臨床醫(yī)生首先考慮的是腦膜炎,王卉主任親自進(jìn)行檢測(cè),正常腦脊液中細(xì)胞較少,T淋巴細(xì)胞為主,以及少量單核細(xì)胞,其他細(xì)胞很難見到。該標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)了一群CD45陰性CD56陽性細(xì)胞。首先考慮非造血系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞可能性大,后來連夜做了更多的標(biāo)志證實(shí)為神經(jīng)母細(xì)胞瘤。及時(shí)反饋給臨床醫(yī)師,盡快進(jìn)一步完善檢查,最后證實(shí)該診斷,患兒獲得及時(shí)正確的治療,至今狀態(tài)良好。

該病例腦脊液細(xì)胞數(shù)量增多不明顯,因此其他檢測(cè)結(jié)果不能提供幫助,流式成為第一個(gè)做出正確診斷提示的技術(shù)。

雖然流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腦脊液非常重要,但是檢測(cè)的困難程度限制了該項(xiàng)目的廣泛臨床應(yīng)用。因此專家們就適用范圍、檢測(cè)方案、操作中注意事項(xiàng)、發(fā)出合理的報(bào)告等幾個(gè)方面詳盡提出推薦方法和推薦強(qiáng)度。

共識(shí)指出:急性白血病、淋巴瘤、轉(zhuǎn)移癌等多種淋巴造血和非造血腫瘤都有可能累及中樞神經(jīng)系統(tǒng),因此急性白血病、有癥狀的其他腫瘤應(yīng)盡可能進(jìn)行腦脊液的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)。

由于腦脊液無法大量取材,細(xì)胞數(shù)量少,細(xì)胞存活時(shí)間短等特點(diǎn),給該技術(shù)檢測(cè)帶來挑戰(zhàn),因此操作和分析過程很重要。

腦脊液標(biāo)本流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)的要點(diǎn)在于:

1、采集后盡快低溫送檢。最好不要超過4-8小時(shí)送到,實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后盡快處理。

2、處理過程中注意回收每一個(gè)細(xì)胞,尤其是標(biāo)記、離心、洗滌的過程中,盡量使用尖底EP管或者試管,用吸管或者移液器去上清。

3、注意保持流式細(xì)胞儀的管道清潔。注意體現(xiàn)為日常儀器保養(yǎng),以及上樣前注意沖洗進(jìn)樣針和管道,避免管間污染。

4、方案設(shè)計(jì)中,注意覆蓋常見疾病重要診斷相關(guān)標(biāo)志,并且因?yàn)榘麧{染色處理過程復(fù)雜,容易丟失細(xì)胞,所以盡量使用胞膜抗體替代胞漿抗體,除非細(xì)胞量大,或者不可替代的情況下,才會(huì)使用胞漿抗體。

5、獲取前,使用血液標(biāo)本調(diào)整好儀器條件,避免用珍貴的腦脊液標(biāo)本調(diào)整儀器條件。

6、獲取過程中,注意盡可能收集所有腦脊液細(xì)胞。但是也要避免獲空。

7、分析過程中,注意正確識(shí)別非特異性染色、死細(xì)胞與真正的細(xì)胞。

8、報(bào)告的時(shí)候,因?yàn)槟X脊液標(biāo)本細(xì)胞數(shù)量少,而流式細(xì)胞術(shù)對(duì)于細(xì)胞檢測(cè)真實(shí)性有效性的判斷,一般是要求最少20-25個(gè)有效細(xì)胞(特殊情況下,有人提出10個(gè)細(xì)胞聚集、背景干凈,可以判斷有效),因此除了報(bào)告腫瘤細(xì)胞的比例,還要求給出細(xì)胞數(shù),就是為了準(zhǔn)確判斷腫瘤負(fù)荷和報(bào)告的可靠性。比如同樣20%腫瘤細(xì)胞,一個(gè)報(bào)告是8個(gè)細(xì)胞,一個(gè)報(bào)告是2000個(gè)細(xì)胞,前者結(jié)果可信度不高,后者是有效報(bào)告。

鑒于臨床實(shí)際工作當(dāng)中,大家所用機(jī)型不一致,如四色流式、八色流式、十色流式,甚至20多色的全光譜流式。雖然目前主流機(jī)型是3激光8-10色,但是為了讓共識(shí)更具有適用性、可行性、普及性,筆者提供了不同方案供大家選擇。對(duì)于這種方案推薦,共識(shí)中尊重每一個(gè)單位,采取建議參考的方式。

共識(shí)中建議大家隨報(bào)告提供彩色圖片,因?yàn)槟[瘤是一個(gè)重大疾病,治療過程漫長(zhǎng),患者經(jīng)常會(huì)轉(zhuǎn)院和會(huì)診,并根據(jù)初治免疫分型進(jìn)行隨訪,所以經(jīng)常會(huì)需要報(bào)告供同行參考。彩色圖片是提供給同行參考的重要圖像依據(jù)。

總之,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腦脊液腫瘤細(xì)胞非常重要,為了更好地讓每個(gè)有條件的實(shí)驗(yàn)室做好流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腦脊液標(biāo)本,王卉主任和劉貴建主任代表中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)組織眾多行業(yè)內(nèi)著名專家完成了這個(gè)共識(shí)。希望給臨床醫(yī)師提供快速、準(zhǔn)確的報(bào)告,從而讓患者盡早獲得精確診斷和適當(dāng)治療。

王卉主任
王卉主任

王卉個(gè)人簡(jiǎn)歷

陸道培醫(yī)療集團(tuán)(河北燕達(dá)陸道培醫(yī)院、北京陸道培醫(yī)院、北京陸道培血液病醫(yī)院)檢驗(yàn)科副主任(副院長(zhǎng)級(jí))、流式細(xì)胞室主任,信納克(北京)生化標(biāo)志物檢測(cè)醫(yī)學(xué)研究有限責(zé)任公司主任、CEO、CMO。從事流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)20年。取得4項(xiàng)國家發(fā)明專利,2項(xiàng)實(shí)用新型專利,3項(xiàng)作品登記。中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)流式細(xì)胞分析診斷專家委員會(huì)主任委員;北京醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)血液和體液檢驗(yàn)分會(huì)副會(huì)長(zhǎng);中國非公立醫(yī)療機(jī)構(gòu)協(xié)會(huì)血液委員會(huì)常委;中國臨床流式聯(lián)盟常委;中國抗癌協(xié)會(huì)淋巴瘤學(xué)組委員、中國血液免疫學(xué)會(huì)流式學(xué)組委員、中國生物工程學(xué)會(huì)細(xì)胞分析專委會(huì)委員,等。累計(jì)在全國和各省市學(xué)術(shù)會(huì)議上講座700余場(chǎng),足跡遍布全國28個(gè)省、自治區(qū)、直轄市(包括臺(tái)灣);累計(jì)接收進(jìn)修醫(yī)200名,來自全國26個(gè)省、自治區(qū)、直轄市(包括臺(tái)灣)。獨(dú)立簽發(fā)40萬臨床報(bào)告,每個(gè)月標(biāo)本中40%是來自全國各地的疑難會(huì)診病例。

消息來源:陸道培醫(yī)療集團(tuán)
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